编辑泵梯度洗脱程序通常涉及以下步骤:
准备工作
确保你使用的液相色谱仪配备有双泵或四元泵,因为梯度洗脱需要多个泵来分别输送不同的流动相。
软件界面设置
打开液相色谱仪的软件界面,找到“泵的控制”部分。
在“泵数”处设置为“2”,表示使用两个泵。
在“初始流量”处设置A泵(输乙腈)为70%,B泵(输水)为30%,因为初始比例为乙腈:水=70%:30%。
时间表设置
在时间表中输入时间点,并设置每个时间点的流动相比例。例如:
初始比例保持时间:2分钟,A处输入“70”。
10分钟内渐变为100%:0,A处输入“100”。
保持10分钟,A处输入“100”。
总时间达到22分钟时,A处重新输入“70”以回到初始比例。
保存设置
设置完成后,选择“加载曲线”按钮,并保存设置,以便在后续实验中使用。
执行梯度洗脱
将进样阀切换至INJECT状态,软件会自动按设置的梯度程序控制泵。
当所有组分都出峰后,按下软件的停止按钮,梯度程序会自动中止,同时流动相比例回到初始流量处所设置的比例。
注意事项
两次进样的间隔时间应不少于十分钟,以确保基线稳定。
在设置梯度洗脱程序时,要确保每个时间点的流动相比例和时间是准确的,以避免实验结果的偏差。
通过以上步骤,你可以编辑并执行一个有效的梯度洗脱程序。根据具体的实验需求和仪器型号,操作步骤可能会有所不同,建议参考仪器的使用手册或咨询专业人士以获得更详细的指导。