程序降温仪是一种用于控制生物样本温度,以便进行冷冻保存的设备。它通过液氮的自然蒸发在杜瓦瓶颈部形成的温场来控制样本的温度和降温速率。以下是使用程序降温仪的基本步骤:
样品处理及实验前准备
冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。
配制冷冻保存溶液(使用前配制):将培养基、血清和DMSO按一定比例混合,制成双倍冻存液,置于室温下待用。
离心收集培养细胞,用加血清的培养基重悬细胞,并计数细胞浓度及冻前存活率。
使用程序降温仪
在程序降温仪中放置细胞悬液,并根据实验要求设定初始温度。
设定升温速度和升温结束温度等参数。
设定降温速度和降温结束温度等参数。
程序降温仪会自动调节温度,实现温度控制。
样本冷冻
取与细胞悬液等量的冻存液,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液。
分装于已标示的冷冻保存管中,并严密封口,注明细胞名称、代数、日期等信息后进行冻存。
数据收集与分析
收集数据,并分析数据,得到样品的热力学和热动力学参数。
建议
在使用程序降温仪时,确保设备外观无损,电源线连接正常,各项功能键能够正常运作。
选择一个干净、舒适的环境进行操作,避免直接阳光照射或过于潮湿的环境。
在设定温度和时间时,要确保参数设置合理,避免温度设置过低或时间过长导致细胞损伤。
使用液氮时,要注意安全,避免冻伤,同时确保液氮的供应稳定。
通过以上步骤,可以有效地使用程序降温仪进行生物样本的冷冻保存。